FFF02 C5891-50无缝克隆试剂盒是一种简单、快速、高效的DNA定向克隆技术，该技术突破传统，不依赖内切酶和连接酶，不受限制性内切酶酶切位点的限制，利用同源重组的原理，可将任何DNA片段克隆至任何载体的任何位点。反应及转化时间短，阳性率高。
FFF02 C5891-50的原理可以概括为三步反应：
1、T5核酸外切酶从DNA片段的5’端切割一条链，产生的单链DNA末端两两配对，形成一个有间隙的环状DNA；
2、DNA聚合酶通过DNA合成填补间隙，产生一个只有缺刻的环状DNA；
3、TaqDNA连接酶通过形成磷酸二酯键修复缺刻，得到一个完整的双链DNA，也就是构建完成的载体。
FFF02 C5891-50的突出优点：
（1）构建的克隆没有任何额外的碱基序列，因此是真正的"无缝克隆"；
（2）可通过一个反应将一个或多个片段快速、定向地插入到载体的任何位置；
（3）待插入的PCR扩增产物无须酶切；
（4）插入片段的大小范围宽，从20bp左右的小片段到10kb左右的大片段都可以成功插入；
（5）可通过PCR扩增获得线性化载体，因此限制性内切酶消化并不是克隆所必须的；
（6）酶催化的重组连接反应非常快速和高效；
（7）只有插入片段和线性化载体的末端才能发生同源重组，可以有效避免非特异性的同源重组。
